共焦显微术的概念早由M. Minsky在20世纪50年代提出。M. Minsky在哈佛大学做研究期间,于1957年对载物台扫描共焦光学蔡司显微镜申报了美国国家。在此成像系统中,采用点光源照明样品,而携带样品信息的光被点探测器收集,利用横向和轴向扫描技术获得整个样品的三维信息。
共聚焦显微镜原理
光学显微镜相机接受所有来自样品表面的信 息,包括聚焦的和非聚焦的平面
而共聚焦蔡司显微镜在光路中增加了针孔,针孔会过 滤掉非焦平面的光,探测器只接收来自样品聚 焦平面的信息
简单来说,共聚焦蔡司显微镜成像有如下步骤:
通过针孔过滤掉非焦平面的信息
一次扫描获得单张只有焦平面信息的图像
通过Z轴方向移动获取多张图像
计算获得每个像素的高度信息
创建表面三维形貌信息